半夏泻心汤对2型糖尿病模型大鼠肝细胞线粒体未折叠蛋白反应的影响
马丽娜, 马丹, 许欣竹, 王艺璇, 刘文俊, 段志园, 单德红
目的:围绕肝细胞线粒体的形态、产能和线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein response,UPRmt),研究半夏泻心汤治疗2型糖尿病的可能机制。方法:选取若干只SPF级雄性SD大鼠,适应性喂养1周后,随机选取8只为正常组给予普通饲料喂养,其余给予高脂高糖饲料喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导T2DM模型;将造模成功的大鼠24只,随机分为模型组、半夏泻心汤组（中药组）、二甲双胍（MET）组,每组8只。采用血糖仪检测空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）;比色法和分光光度计法测定肝组织ATP和反应性氧簇（reactive oxygen spieces,ROS）含量;透射电镜观察肝细胞线粒体超微结构;Western blot法检测UPRmt相关蛋白表达。结果:模型组、MET组和中药组的体质量均低于正常组,FPG均高于正常组,差异均有统计学意义（P<0.05）。MET组和中药组的FPG均低于模型组,差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组和MET组的ATP均低于正常组,且中药组高于模型组,差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组和中药组的ROS均高于正常组,但MET组和中药组均低于模型组,差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组线粒体肿胀,电子密度下降;MET组和中药组线粒体形态基本正常,但也有电子密度下降情况。中药组LonP表达高于正常组、模型组和MET组,差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组ClpX表达低于正常组,MET组、中药组均高于模型组,差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组ClpP表达低于正常组,MET组、中药组均高于模型组,且中药组高于MET组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:T2DM发生时肝细胞UPRmt损伤,而半夏泻心汤可能通过提升UPRmt而保护肝细胞线粒体,从而有效干预2型糖尿病。