基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在结核分枝杆菌耐药检测中的应用价值研究
余艳芳, 赵开顺, 屠春林, 陈娓, 梁海鹰, 易清清, 梁凯轶, 孙亚蒙
背景结核复治患者耐药情况复杂。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)可一次性检测菌株对多种临床常见抗结核药物的耐药性,进而利于抗结核治疗方案的制定。目的分析MALDI-TOF在结核分枝杆菌耐药检测中的应用价值。方法收集2016—2020年上海市嘉定区中心医院肺科诊治的200例复治肺结核患者的痰液标本。以最低药敏浓度(MIC)法为本次药敏试验的"金标准",评价MALDI-TOF对结核分枝杆菌耐药性的检出情况,采用三代测序验证MALDI-TOF检测结核分枝杆菌耐药相关位点突变的准确性。结果以MIC法为药敏试验的"金标准",MALDI-TOF检测结核分枝杆菌对利福平耐药的灵敏度为93.1%、特异度为87.8%、正确率为90.5%、Kappa值为0.810;MALDI-TOF检测结核分枝杆菌对异烟肼耐药的灵敏度为77.2%、特异度为98.6%、正确率为85.0%、Kappa值为0.701;MALDI-TOF检测结核分枝杆菌对左氧氟沙星耐药的灵敏度为77.8%、特异度为99.0%、正确率为88.5%、Kappa值为0.769;MALDI-TOF检测结核分枝杆菌对莫西沙星耐药的灵敏度为85.7%、特异度为76.2%、正确率为78.5%、Kappa值为0.516;MALDI-TOF检测结核分枝杆菌对阿米卡星耐药的灵敏度为94.9%、特异度为89.4%、正确率为90.5%、Kappa值为0.736;MALDI-TOF检测结核分枝杆菌对卷曲霉素耐药的灵敏度为88.9%、特异度为87.8%、正确率为88.0%、Kappa值为0.654。MALDI-TOF检测的耐药突变位点与三代测序检测的耐药突变位点一致率为100%,此外三代测序还获得MALDI-TOF检测体系中未涉及的突变位点。结论通过MALDI-TOF检测的结核分枝杆菌对常用抗结核药物耐药结果与MIC法高度或中度一致,其检测的耐药突变位点与三代测序检测的耐药突变位点一致率为100%,故MALDI-TOF检测的结核分枝杆菌耐药结果可以作为临床鉴定结核分枝杆菌药敏试验结果的有效补充。