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华北理工大学学报(医学版)

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2017年05期

华北理工大学学报(医学版)

18
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本期目录共 18 篇文章

1

不同浓度米诺环素刺激骨髓细胞对小鼠体外肝细胞损伤的影响

文翠, 肖芳, 徐凯智, 赵昕, 王晓群, 陈楠, 刘庆阳

(1)目的探讨不同浓度米诺环素刺激的骨髓细胞对体外培养的小鼠肝细胞损伤的保护作用。（2）方法获取C57BL/6小鼠同基因背景下绿色荧光骨髓细胞,分为6组:对照组（b0组）、不同浓度米诺环素刺激组(b1～5组)。b0组为单纯骨髓细胞培养组,b1～5组分别加入不同浓度（5、10、20、50、100μg/mL）米诺环素;将b0～5组置于37℃、5%CO2培养箱培养培养24小时后,各取出一部分骨髓细胞用MTT法检测其增生率;获取C57BL/6小鼠肝细胞,分为8组(a、aL、a0～5组),除对照组（a组,为单纯肝细胞培养组）外,其余各组加入终浓度100μg/mL的脂多糖（LPS）,建立肝细胞损伤模型。a0～5组分别相应加入b0～5组培养的骨髓细胞2×10～6个,a、aL组加入等容积的PBS液,置于37℃、5%CO2培养箱培养,1～2天换液,动态观察肝细胞生长情况并检测肝细胞的凋亡率。（3）结果与b0组相比,不同浓度米诺环素刺激24小时后骨髓细胞的增生率有所不同,b1组（5μg/mL）最高,b5组（100μg/mL）最低。与a组相比较,aL肝细胞受损严重,凋亡率增加;a0～5组肝细胞有不同程度的增殖,其凋亡率有所降低,以低浓度5μg/mL效果最优。（4）结论本次实验显示5μg/mL的米诺环素刺激的骨髓细胞对体外受损肝细胞有保护作用,其机制可能为米诺环素提高骨髓细胞增生率,增加骨髓细胞活性,从而降低肝细胞凋亡和促进肝细胞增殖。

0页码：337-342DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.001
米诺环素脓毒症肝细胞骨髓细胞
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2

PA-MSHA对结肠癌细胞HT29迁移的抑制作用

陈萌, 李琳, 王一同, 吴淦, 马雨萌

(1)目的探讨铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝素菌毛株菌苗(PA-MSHA)对结肠癌细胞HT29的迁移抑制作用,并分析其可能的作用机制。(2)方法培养结肠癌细胞株HT29,以不同剂量的PA-MSHA作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态,Transwell小室检测不同剂量PA-MSHA对结肠癌细胞迁移作用的影响,应用Western Blot检测PA-MSHA作用前后基质蛋白MMP-2的表达情况。(3)结果 PA-MSHA作用后,光镜下观察细胞生长受阻;PA-MSHA处理组结肠癌细胞迁移数量均低于对照组,且随着药物浓度的升高,迁移细胞数量逐渐减少;高剂量及低剂量PA-MSHA处理组细胞MMP-2表达均低于对照组,且高剂量组低于低剂量组,差异均有统计学意义。(4)结论 PA-MSHA能够抑制结肠癌细胞HT29的迁移,作用机制可能与其下调MMP-2的表达有关。

1页码：343-346DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.002
PA-MSHA结肠癌迁移
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3

重组人促红细胞生成素对脓毒症小鼠肝脏的保护作用

玄春月, 肖芳, 杨舒楠, 王晓群, 刘庆阳, 徐凯智

(1)目的探讨促红细胞生成素对脓毒症小鼠受损肝脏的保护作用。（2）方法在体实验:取雄性C57BL/6小鼠50只,分为5组,每组10只,分别为对照组（C组）,脓毒症组（CLP组）,重组人促红细胞生成素低、中、高浓度组（E1、E2、E3）,其中E1、E2、E3的剂量分别为10IU/kg、100IU/kg、1000IU/kg,除了C组外的小鼠均进行盲肠结扎穿孔（CLP）造模,造模后分别注射对应剂量的生理盐水及药物,共观察5天,记录各组小鼠的死亡率。离体实验:再取50只雄性C57BL/6小鼠,处理方法同上,在建模后的第24小时将小鼠处死,检测血清中的谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）浓度,将肝脏取下处理后,在样本中加入7AAD,用流式细胞仪检测肝脏细胞的凋亡率。（3）结果在体实验:E2、E3组小鼠死亡率明显低于CLP组和E1组差异有统计学意义（P<0.05）。离体实验:E2、E3组小鼠肝脏的AST、ALT浓度以及其肝脏的凋亡率明显低于CLP组和E1组差异有统计学意义（P<0.05）。（4）结论促红细胞生成素对脓毒症受损肝细胞能起到一定的保护作用,并可改善脓毒症小鼠的预后,降低死亡率。

0页码：347-351DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.003
促红细胞生成素脓毒症小鼠肝损伤保护作用
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4

COPD患者血清IL-17与8-iso-PGF2α水平变化及临床意义

黄超, 王昊辰, 李丽蕊, 崔紫阳, 戈艳蕾, 李立群, 白杰宇, 王红阳

(1)目的探讨白介素-17（IL-17）与8-异前列腺素(8-iso-PGF2α)在慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血清中水平变化及临床意义。（2）方法选择COPD患者80例作为观察组,按病情严重程度分为A、B、C、D 4期各20例;同期选取健康体检者30例作为对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组血清中IL-17、8-iso-PGF2α水平。（3）结果观察组血清IL-17、8-iso-PGF2α水平均高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）,且均随疾病加重而增高;观察组患者血清IL-17、8-isoPGF2α水平呈正相关（r=0.675,P<0.05）。（4）结论血清IL-17、8-iso-PGF2α参与COPD发病且与疾病严重程度有关。

1页码：352-355DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.004
慢性阻塞性肺疾病白介素-178-异前列腺素F2α
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5

生长激素抑制素基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定

赵倩, 夏凤艳, 刘聪慧

(1)目的探讨构建人生长激素抑制素(Somatostatin,SST)基因过表达慢病毒载体的技术方法,为后续构建SST过表达子宫内膜癌细胞系提供基础。(2)方法通过设计SST基因引物,使用聚合酶链反应(PCR)的方法,扩增SST基因片段;使用EcoR I和BamHI两种限制性内切酶进行双酶切pLVX-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro慢病毒载体和目的基因SST片段,将两者酶切后的片段使用T4DNA连接酶进行连接,从而使将SST基因插入pLVX-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro慢病毒载体上,构建pLVX-SST-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro重组载体;运用双酶切后PCR方法鉴定阳性克隆的pLVXSST-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro载体;将重组载体转染293T细胞(人胚肾细胞),进行慢病毒包装并且观察其感染效率及测定病毒滴度。(3)结果通过PCR成功扩增SST基因并连接到pLVX-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro慢病毒载体上,通过DNA测序鉴定,并与GenBank上的SST基因标准序列进行对比,证明pLVX-SST-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro过表达慢病毒载体构建成功,将其转染293T细胞后可观察到绿色荧光的表达。成功包装SST过表达慢病毒载体然后测其滴度为1.0×108 TU/mL。(4)结论成功构建pLVX-SST-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro慢病毒载体,为SST基因的后续研究提供了实验基础。

1页码：356-360DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.005
生长激素抑制素慢病毒过表达载体构建
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6

Toll样受体4和转化生长因子-β1在子宫内膜癌中的临床表达

杨莉, 韩萍, 王秀娟, 代娟

(1)目的检测Toll样受体4(TLR4)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在子宫内膜癌中的表达及意义。(2)方法应用免疫组化法检测正常增生期子宫内膜组织标本30例、不典型增生子宫内膜组织标本30例和子宫内膜癌组织标本60例中TLR4和TGF-β1的表达情况。(3)结果 TLR4和TGF-β1在子宫内膜癌中的表达显著高于正常增生期子宫内膜组织和不典型增生子宫内膜组织,差异均有统计学意义(P<0.05);TLR4在子宫内膜癌中的表达与肌层浸润、淋巴结转移有关(P<0.05);TGF-β1在子宫内膜癌中的表达与病理分期、肌层浸润和淋巴结转移相关(P<0.05)。TLR4和TGF-β1在子宫内膜癌中的表达呈正相关(P<0.05)。(4)结论 TLR4和TGF-β1的阳性表达与子宫内膜癌的发生、发展及恶性程度有一定的关系。

6页码：361-364DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.006
子宫内膜癌Toll样受体4转化生长因子-β1
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7

不同宫颈病变组织中HPV分型及P16、Ki-67的表达

韩翠娜, 邹歌, 李丹丹, 陈燕

(1)目的讨论不同宫颈病变组织中人乳头瘤病毒（HPV）的基因分型及多肿瘤抑制基因（P16）、Ki-67的表达情况。（2）方法收集2015年7月2016年8月因液基细胞学检测异常或HPV感染就诊于我院的患者91例均行阴道镜检查及活检,包括低级别宫颈上皮内瘤变（low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL）组、高级别宫颈上皮内瘤变（high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL）组各31例,以及宫颈鳞癌组29例;选择同期32例慢性宫颈炎患者作为对照组。采用Cobas4800技术检测高危型HPV（HR-HPV）在不同宫颈病变组织中的感染情况,采用免疫组化技术检测不同宫颈组织中P16和Ki-67的表达强度。（3）结果随着宫颈病变程度的增加,HR-HPV的感染率增高,HRHPV在不同宫颈组织中的感染率差异显著（χ2=26.67,P<0.05）;入选患者中主要为单一HR-HPV感染,随着宫颈病变程度的增加,HR-HPV的多重感染率也增加,且不同宫颈病变组织间的多重感染率差异有统计学意义（χ2=15.934,P<0.05）。P16、Ki-67在不同宫颈组织中表达水平差异显著,均有统计学意义（P<0.05）,且其表达水平与宫颈病变程度密切相关,随着宫颈病变程度的增加,P16、Ki-67的表达水平和染色范围逐渐增加,经过Spearman相关分析,计算结果分别为γ=0.784、γ=0.840,双侧检验水准P<0.05。（4）结论 HR-HPV的感染率及P16、Ki-67的表达强度与宫颈病变程度密切相关,P16和Ki-67有望作为诊断宫颈病变程度的重要辅助指标。

5页码：365-369+374DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.007
宫颈病变高危型HPVP16Ki-67
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8

负压引流联合rh-aFGF持续冲洗治疗糖尿病足Wagner3级创面的疗效观察

刘宣, 徐刚, 姜海, 段晨旺, 魏刚强, 刘宇

(1)目的研究负压引流联合重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombinant human acidic fibroblast growth factor,rh-aFGF)治疗糖尿病足Wagner3级创面的临床效果。(2)方法选择2016年1～12月我院收治的糖尿病足Wagner3级创面患者60例,以入院病案号为编号,根据随机数字表,将患者随机分成观察组和对照组,各30例。观察组采用间歇性负压模式下负压引流联合rh-aFGF持续冲洗治疗,对照组除冲洗液为生理盐水外,其他操作同观察组。连续治疗7天,7天后拆除负压吸引装置。比较两组治疗前及治疗后第7天感染性实验室指标、创面肉眼观察、计算伤腔容积减少值及肉芽组织生长评分。(3)结果治疗后第7天,创面感染性实验室指标(白细胞计数、血沉及C-反应蛋白)观察组改善优于对照组;观察组患者创面肉芽组织生长情况优于对照组;观察组和对照组伤腔容积减少值分别为(11.14±1.14)mL和(3.88±2.10)mL,前者优于后者(P<0.05);实验组和对照组肉芽组织生长评分分别为(1.39±0.66)分和(0.89±0.05)分,前者优于后者(P<0.05)。(4)结论负压引流联合rh-aFGF持续冲洗是促进糖尿病足Wagner3级创面快速愈合较为有效的方法之一,值得推广。

8页码：370-374DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.008
负压引流重组人酸性成纤维细胞生长因子糖尿病足
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9

不同益生菌联合铋剂四联疗法根除幽门螺杆菌疗效观察

杨少鹏, 李志婷, 张秀静, 张竹青

(1)目的探讨不同益生菌联合铋剂四联疗法对幽门螺杆菌（H.pylori）根除疗效的影响。（2）方法选择内镜下快速尿素酶试验或14C-UBT确诊H.pylori阳性患者120例,随机分成四组。A组:铋剂四联疗法（雷贝拉唑钠、阿莫西林、克拉霉素、枸橼酸铋钾）;B组:铋剂四联疗法加用双歧三联活菌片;C组:铋剂四联疗法加用凝结芽孢杆菌活菌片;D组:铋剂四联疗法加用布拉酵母菌散。四组用药均10天。记录患者在服药过程中出现不良反应的情况,并于停药4周后复查14C-UBT。（3）结果 B组、D组H.pylori根除率显著高于A组,差异有统计学意义（P<0.05）。C组根除率高于A组,但差异无统计学意义（P>0.05）;B组、C组、D组的不良反应发生率均显著低于A组（P<0.05）。B、C、D三组间根除率及不良反应发生率差异均无统计学意义（P>0.05）。（4）结论双歧三联活菌、布拉酵母菌均可提高H.pylori根除率并降低不良反应的发生率;凝结芽孢杆菌虽不能提高H.pylori的根除率,但可有效降低不良反应的发生。

13页码：375-378DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.009
益生菌铋剂四联疗法幽门螺杆菌
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10

关节镜手术治疗盘状半月板损伤疗效及影响因素分析

孙书宏, 张义庚

(1)目的分析关节镜手术治疗盘状半月板损伤的临床疗效及影响因素。（2）方法选取2014年5月2016年5月唐山市第二医院关节一科接受关节镜手术治疗的盘状半月板患者60例为研究对象,手术方式分为半月板部分切除成形术和半月板全切术。术前及术后3、6、12个月用Lyscholm功能评分评价关节镜手术治疗盘状半月板损伤的临床疗效,术后应用Ikeuchi评分及Tegner运动能力评分评估年龄、性别、体质量指数（BMI）、症状持续时间、半月板损伤类型、手术方式对关节镜手术治疗盘状半月板损伤疗效的影响。（3）结果所有病例均得到有效随访,且术后症状基本消失。术后3个月,关节镜下半月板部分切除成形术与关节镜下半月板全切术后患者Lyscholm评分差异有统计学意义（P<0.05）;术后6个月及12个月差异无统计学意义（P>0.05）。术后按Ikeuchi评分评估:优38例,良14例,可差8例,优良率86.7%。患者年龄、半月板撕裂类型及症状持续时间对盘状半月板损伤的术后临床疗效有一定的影响,而性别、BMI及手术方式则无明显影响。（4）结论关节镜手术治疗盘状半月板损伤具有损伤小、恢复快等优点,是治疗盘状半月板损伤的首选方法,且年轻患者、症状持续时间短者术后效果显著,混合撕裂对盘状半月板损伤患者术后恢复影响较大,故盘状半月板损伤患者应尽早行手术治疗,术后进行积极康复功能锻炼。

2页码：379-384+390DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2017.05.010
关节镜治疗盘状半月板损伤影响因素
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