摘要

目的:探讨清解扶正颗粒(QFG)对大肠癌SW620细胞增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制。方法:体外培养人大肠癌SW620细胞,用不同浓度的QFG(0、0.5、1、2 mg/mL)作用于细胞,采用MTT法检测24、48 h后QFG对细胞增殖的抑制能力;在倒置显微镜下观察24 h后细胞形态变化;采用流式细胞术检测24 h后细胞周期;通过Hoechst 33258染色实验检测24 h后细胞凋亡情况;采用划痕实验检测0、6、12、24 h后细胞的迁移能力;通过Western blot方法检测24 h后细胞Ki-67、MMP-2及Cleaved-Caspase-3蛋白的表达。结果:①0、0.5、1、2 mg/mL浓度范围内,QFG对大肠癌SW620细胞增殖抑制率随时间及浓度的增加而增大,明显高于同一时间点对照组的细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。②0.5、1、2 mg/mL QFG作用SW620细胞24 h后,细胞形态发生明显的改变,随着给药浓度的增高,细胞密度逐渐减少,悬浮细胞增多,部分细胞皱缩变圆。③流式细胞术检测细胞周期发现,0.5、1、2 mg/mL QFG组细胞G1期降低,S期增高,而G2期并没有明显的变化,各时期百分比与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),但并不呈剂量依赖关系。④Hoechst33258染色结果显示,随着QFG作用浓度增加,SW620细胞凋亡的形态学表现越明显。⑤划痕实验发现,0.5、1、2 mg/mL QFG能降低SW620细胞的迁移能力,划痕愈合率随着作用时间和QFG浓度增加而逐渐降低,呈现明显的时间和剂量依赖作用;与对照组比较,12 h和24 h划痕愈合率差异有统计学意义(P<0.01)。⑥与对照组比较,0.5、1、2 mg/mL QFG能显著降低Ki-67和MMP-2的蛋白表达,增加Cleaved-Caspase-3的蛋白表达,且呈现明显的剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:QFG具有抑制大肠癌SW620细胞增殖、诱导凋亡及抑制迁移的作用,其作用机制可能与下调Ki-67和MMP-2蛋白表达及上调CleavedCaspase-3蛋白表达有关。

关键词