摘要

目的：基于Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路研究藏红花素对局灶性脑缺血再灌注损伤（FCIR）大鼠的神经元保护作用，探讨藏红花素防治FCIR损伤可能的作用机制。方法：将128只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、藏红花素组、藏红花素+脂多糖组，每组32只。造模前7 d开始，藏红花素组通过腹腔注射藏红花素溶液；藏红花素+脂多糖组通过腹腔注射藏红花素溶液、脂多糖溶液；假手术组和模型组通过腹腔注射生理盐水。4组注射剂量均为5 mL/（kg·d）,1次/d，连续干预7 d。采用线栓法复制FCIR大鼠模型。再灌注24 h后，采用改良神经功能缺损评分（mNSS）评价大鼠神经功能缺损状况；采用氯化三苯四氮唑（TTC）染色法、干湿重法分别计算脑梗死率和脑组织含水量；采用苏木精-伊红（HE）染色法、TUNEL染色法观察皮质神经元病理学改变和凋亡状况；采用ELISA法检测脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子水平；采用Western blot法检测TLR4、核因子-κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα、Cleved Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达。结果：(1)神经功能、脑梗死率及脑含水量：与假手术组比较，模型组大鼠mNSS评分、脑梗死率、脑含水量明显升高（P<0.05）；与模型组比较，藏红花素组和藏红花素+脂多糖组mNSS评分、脑梗死率、脑含水量均明显降低（P<0.05）；与藏红花素组比较，藏红花素+脂多糖组mNSS评分、脑梗死率、脑含水量均明显升高（P<0.05）。(2)皮质神经元病理学改变及凋亡状况：假手术组皮质神经元形态正常、结构完整；模型组皮质神经元可见排列紊乱、数量减少、空泡变性、胞浆固缩深染、核膜边界不清、炎细胞浸润等病理学改变；藏红花素组皮质神经元病理学改变明显改善。与假手术组比较，模型组皮质神经元凋亡指数明显升高（P<0.05）；与模型组比较，藏红花素组和藏红花素+脂多糖组凋亡指数明显降低（P<0.05）；与藏红花素组比较，藏红花素+脂多糖组凋亡指数明显升高（P<0.05）。(3)炎症因子水平：与假手术组比较，模型组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，藏红花素组和藏红花素+脂多糖组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低（P<0.05）；与藏红花素组比较，藏红花素+脂多糖组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高（P<0.05）。(4)蛋白表达：与假手术组比较，模型组TLR4、Cleved Caspase-3相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2表达比值均明显升高（P<0.05）；与模型组比较，藏红花素组和藏红花素+脂多糖组TLR4、Cleved Caspase-3相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2表达比值均明显降低（P<0.05）；与藏红花素组比较，藏红花素+脂多糖组TLR4、p-NF-κB、p-IκBα相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα表达比值明显升高（P<0.05）。结论：藏红花素能够抑制FCIR大鼠炎症反应和皮质神经元凋亡，减轻皮质神经元损伤，其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路活化有关。

关键词