摘要

目的研究栝楼桂枝汤（GLGZD）对氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）诱导的小鼠海马HT22神经细胞损伤的保护作用机制。方法将HT22细胞分为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。正常组在完全培养基,37℃、5%CO2恒温培养箱中培养;模型组经OGD/R诱导损伤,完全培养基培养24 h后,将完全培养基更换无糖EBSS培养基后,置于1%O2、5%CO2、94%N2低氧培养工作站培养90 min,再将无糖EBSS培养基更换为完全培养基,放置于37℃、5%CO2恒温培养箱复氧培养24 h,复氧复糖;低、中、高剂量组在经OGD/R诱导损伤,复氧复糖过程中分别于完全培养基中加入50、100、200μg/mL GLGZD药液。CCK-8法检测各组细胞生长活力,根据细胞生长活力百分比,筛选GLGZD最佳干预浓度为200μg/m L。后续将HT22细胞分为正常组、模型组、GLGZD组,正常组和模型组细胞处理同前,GLGZD组在经OGD/R诱导损伤,复氧复糖过程中于完全培养基中加入200μg/m L GLGZD药液,DAPI染色观察凋亡情况,荧光定量法检测Caspase-3活性。结果 DAPI染色显示:正常组细胞形态正常,无损伤;模型组呈现明显的凋亡形态;而GLGZD组细胞凋亡形态虽未达到正常水平,但是较模型组有明显恢复。荧光定量法检测Caspase-3活性结果显示:模型组Caspase-3活性荧光强度比值明显增强;而GLGZD组Caspase-3活性荧光强度比值虽未达到正常水平,但是较模型组明显下降。结论 GLGZD可通过抑制细胞凋亡,保护神经细胞,为临床治疗脑卒中提供基础理论依据。

关键词