摘要

目的 研究蛇伤胶囊对竹叶青蛇伤血管内皮细胞Cyt-C/Bcl-2信号通路的影响。方法 20只新西兰大白兔被随机分为空白组和中药组，每组10只，分别制备常规兔血清和含药兔血清。人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）传代后随机分为正常组、模型组、低、中、高剂量含药血清组5组。正常组以10%正常兔血清培养，模型组在正常组的基础上以5μg/mL竹叶青蛇毒液培养，低、中、高剂量组分别在模型组基础上培养6 h后加入5%、10%、15%的含药兔血清培养。各组培养72 h后，收集细胞，流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡率，Western blot法检测HUVEC细胞浆及线粒体内Cyt-C、AIF蛋白表达，RT-qPCR法检测HUVEC中Bax、Bak、Bad、Bid、Bcl-xl、Bcl-w、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组细胞凋亡率明显提高（P<0.01）；细胞浆Cyt-C、AIF的蛋白表达明显提高（P<0.01），线粒体内Cyt-C、AIF的蛋白表达明显下降（P<0.01）;Bax、Bak、Bad、Bid、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达明显提高（P<0.01）,Bcl-xl、Bcl-w、Bcl-2 mRNA表达明显下降（P<0.01）。与模型组比较，低、中、高剂量组细胞凋亡率明显降低（P<0.01）；细胞浆Cyt-C、AIF蛋白表达明显降低（P<0.01），线粒体内Cyt-C、AIF蛋白表达明显提高（P<0.01）;Bax、Bak、Bad、Bid、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达明显降低（P<0.01）,Bcl-xl、Bcl-w、Bcl-2 mRNA表达明显提高（P<0.01）。与中剂量组比较，低、高剂量组细胞凋亡率明显增加（P<0.01）；细胞浆Cyt-C、AIF蛋白表达明显提高（P<0.01），线粒体内Cyt-C、AIF蛋白表达明显下降（P<0.01）;Bax、Bak、Bad、Bid、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达明显增加（P<0.01）,Bcl-xl、Bcl-w、Bcl-2 mRNA表达明显下降（P<0.01）。结论 蛇伤胶囊能够通过调控Cyt-C/Bcl-2信号通路抑制竹叶青蛇伤血管内皮细胞凋亡，从而治疗竹叶青蛇伤及其引起的血管损伤。

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