摘要

目的 从自噬途径探讨早期电针长强穴对缺血缺氧性脑损伤（HIBD）新生大鼠海马CA1区神经元细胞损伤修复及神经功能改善的作用机制。方法 将69只7日龄新生SD大鼠，采用随机数字表法分成空白组12只、假手术组12只和造模组45只；造模组随机数字表法分成模型组、电针组和三甲基腺嘌呤（3-MA）+电针组各15只，采用改良Rice Vannucci法制备HIBD模型，3-MA+电针组在造模前尾静脉注射3-MA，制备模型成功后每组采用随机数字表法选取12只进入实验。空白组不予任何处理，假手术组仅分离左侧颈总动脉，不予结扎，缝合消毒，不做缺氧处理。造模后6 h开始干预，连续干预3 d。电针组和3-MA+电针组进行电针长强穴干预，其他组别模拟固定。干预后比较5组大鼠体质量及倾斜板转头时间，Zea Longa法比较5组大鼠的神经功能缺损评分，免疫组织化学法检测5组大鼠海马CA1区神经元中神经元特异性核蛋白（NeuN）表达水平，透射电子显微镜观察5组大鼠海马CA1区神经元结构及自噬小体情况，Western blot法检测5组大鼠海马CA1区微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）蛋白表达量。结果 与空白组比较，假手术组大鼠干预后转头时间、体质量、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达量差异无统计学意义（P>0.05）；与空白组比较，模型组大鼠干预后转头时间、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达量均升高（P<0.05），体质量降低（P<0.05）；与模型组比较，电针组和3-MA+电针组大鼠干预后转头时间、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低（P<0.05），体质量升高（P<0.05）。透射电子显微镜观察发现，干预后空白组和假手术组大鼠海马区神经元细胞结构基本完整，未发现自噬小体形成；模型组大鼠海马区神经元细胞结构被破坏，部分呈空泡样，可见自噬小体及溶酶体形成；电针组海马区神经元细胞结构较模型组改善，可见少量自噬小体及溶酶体；3-MA+电针组海马区神经元细胞结构相对完整，仅见个别自噬小体。结论 早期电针长强穴可降低大鼠海马CA1区神经元中的NeuN含量及LC3-Ⅱ蛋白表达，抑制海马CA1区损伤后的神经元自噬，减轻脑损伤，从而改善HIBD大鼠神经功能。

关键词