摘要

目的 通过网络药理学、分子对接技术并结合细胞实验，探讨清解扶正颗粒（QFG）逆转结直肠癌（CRC）耐药的活性成分、潜在靶点及作用机制。方法 体外实验验证人大肠癌HCT-8/ANRIL细胞多药耐药性以及QFG对HCT-8/ANRIL细胞耐药性的逆转作用。依托TCMSP数据库筛选QFG的有效活性成分，利用PubChem、SwissTargetPrediction数据库预测对应靶点，通过GeneCards、OMIM、PharmGKB数据库收集与CRC耐药相关的疾病靶点，取两者交集。通过Cytoscape 3.9.1软件构建中药-活性成分-靶点网络，STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络并筛选核心靶点；DAVID平台对交集靶点进行基因本体论（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析；使用AutoDock Vina软件对QFG主要活性成分和关键靶点进行分子对接。进一步通过qPCR检测预测核心靶点的mRNA相对表达水平；Western blot检测预测关键通路相关蛋白表达量。结果 实验结果显示，HCT-8/ANRIL细胞具有多药耐药性，QFG对其耐药性具有逆转作用。网络药理学分析显示，QFG活性成分对应靶点465个，CRC耐药靶点1 802个，QFG与CRC耐药交集靶点175个；筛选出QFG的主要活性成分黄芩素、高车前素、木犀草素等；QFG逆转CRC耐药的可能关键靶点为Akt1、IL-6和EGFR等，信号通路涉及PI3K/Akt、Ras、MAPK、EGFR等；分子对接显示，QFG主要活性成分与关键靶点对接活性良好。体外实验结果表明QFG可明显下调HCT-8/ANRIL细胞中IL-6和EGFR的mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白的表达（P<0.05）。结论 QFG逆转结直肠癌耐药的物质基础主要为黄芩素、高车前素、木犀草素等，IL-6、EGFR及PI3K/Akt信号通路是其关键作用靶点和重要途径。

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