摘要

目的研究RNA干扰Caspase-3基因表达对缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响,探讨Caspase-3基因表达的RNA干扰方法在缺氧诱导的心肌细胞凋亡中的作用与机制。方法以基于Caspase-3基因的small interference RNA(siRNA)处理缺氧诱导的心肌细胞,不同时期分别检测心肌细胞凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出、钙浓度、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot法分别检测Caspase-3基因表达水平和蛋白表达水平。结果缺氧诱导心肌细胞后,心肌细胞、凋亡率随时间进程明显增加。缺氧诱导使心肌细胞LDH漏出、钙浓度、MDA含量增加而SOD活性降低。缺氧诱导下RNA干扰组心肌细胞Caspase-3基因mRNA转录水平、蛋白表达水平和心肌细胞凋亡率较空白对照组和错义RNA干扰组差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于Caspase-3基因的RNA干扰显著抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡率,提示Caspase-3基因表达在缺氧诱导的心肌细胞凋亡中具有重要的作用。

关键词