摘要

①目的研究Twist基因转染人胃癌细胞株MKN28对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。②方法利用DNA的限制性内切酶双酶切技术鉴定重组质粒PCDNA3.1-Twist、脂质体介导转染技术和G418筛选得到稳定表达Twist蛋白的Twist-MKN28(PCD-NA3.1-Twist转染的MKN28胃癌细胞株)细胞模型;采用Western blot检测细胞中Twist的表达;采用ElISA法检测细胞上清液中VEGF的蛋白表达量;采用半定量逆转录多聚酶链反应RT-PCR技术检测细胞中VEGF的mRNA表达量。③结果阳性质粒组Twist-MKN28细胞的Twist蛋白表达强于空白质粒组PCDNA3.1-MKN28和未转染组MKN28;Twist-MKN28组细胞上清液VEGF蛋白分泌明显增加,与PCDNA3.1-MKN28组和MKN28组比较差异有显著性(P<0.05),Twist-MKN28组细胞VEGF mRNA半定量结果和MKN28组、PCD-NA3.1-MKN28组比较,其表达量分别增加28.3%和26.5%,而PCDNA3.1-MKN28组和MKN28组比较无明显改变。④结论 Twist可促进人胃癌细胞株MKN28中VEGF的表达。

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