
[1] 华北理工大学基础医学院
(1)目的探讨小鼠有机溶质转运体β亚单位(organic solute transporter beta,OSTβ)的点突变OSTβ(K70Q)对OSTα-OSTβ膜定位的影响。(2)方法提取小鼠回肠RNA,克隆OSTα和OSTβ的编码序列,测序检测OSTβ(K70Q)突变体,进而构建OSTα、OSTβ和OSTβ(K70Q)的双分子荧光互补BiFC表达载体及绿色荧光蛋白GFP融合蛋白,转染HEK-293细胞,于共聚焦显微镜下观察OSTβ(K70Q)对OSTα与OSTβ的相互作用和膜定位的影响。(3)结果突变不影响OSTα和OSTβ(K70Q)的相互作用,但阻碍了OSTα-OSTβ(K70Q)复合体的膜转位,并且可通过显性负效应干扰正常OSTα-OSTβ复合体的膜转位。(4)结论发现了1个小鼠OSTβ的点突变OSTβ(K70Q),突变不影响OSTα和OSTβ(K70Q)的相互作用,但阻碍了OSTα-OSTβ(K70Q)复合体的膜转位,并且可通过显性负效应干扰正常OSTα-OSTβ复合体的膜转位。
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