摘要

目的针对携带肉瘤融合基因(FUS)突变的肌萎缩侧索硬化(ALS)患者皮肤成纤维细胞进行FUS线粒体功能的探索。方法活检获取2008～2012年北京大学第三医院神经内科门诊确诊的携带FUS-R524W基因突变的家族性ALS患者及年龄性别相匹配的健康对照皮肤组织,培养并建立成纤维细胞系;采用PCR扩增和直接测序的方法测定基因突变位点;共聚焦检测线粒体膜电位的功能。结果共聚焦检测发现,FUS-P524W突变组比对照组成纤维细胞红色荧光较弱,绿色荧光明显增强,线粒体膜电位ΔΨm较低。对照组成纤维细胞中红/绿荧光强度的比值是2.23±0.06,突变的成纤维细胞中红/绿荧光强度的比值是1.68±0.06。突变相比对照组线粒体膜电位ΔΨm明显降低,红/绿荧光强度的比值相比对照组减少了33%。结论在携带FUS突变的ALS患者成纤维细胞内出现线粒体功能异常改变,患者的外周组织成纤维细胞可作为ALS发病机制研究的有力工具,更益于将来可能的临床应用,为挑选活性理想药物候选物及其后续研究提供了可行性依据。

关键词