摘要

目的:观察烟草烟雾暴露人气道上皮细胞(16HBE)后,发生间充质转分化(EMT)样改变。方法:(1)以不同浓度(5～50μg/mL)CSC刺激16HBE 7 d,用CCKit-8检测细胞总体活性,筛选最佳浓度。(2)用CSC最大活性影响浓度刺激16HBE 7 d,观察细胞形态改变,经Western-blot法和细胞免疫荧光技术检测上皮细胞标志物E钙黏蛋白(E-cad)及EMT标记物1型胶原(COL1)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平。结果:(1)不同浓度CSC刺激后,16HBE在10μg/mL时OD值最高,为(2.562±0.045)。各浓度间OD值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)经10μg/mL CSC刺激后,部分16HBE形态由鹅卵石状向长梭形、多角形或星形改变。(3)Western-blot检测发现试验组COL1、MMP-9的蛋白表达量分别为(0.566±0.011)和(0.463±0.003),高于对照组(0.272±0.020)和(0.201±0.023),差异均有统计学意义(P<0.05);而E-cad蛋白表达量则明显低于对照组,分别为(0.301±0.041)和(0.591±0.068),差异有统计学意义(P<0.05)。(4)细胞免疫荧光检测发现试验组COL1、Vimentin和MMP-9蛋白表达量均高于对照组(P<0.05);而E-cad蛋白表达量明显低于对照组(P<0.05)。结论:经CSC刺激后,16HBE可出现转分化样改变。

关键词