摘要

目的:研究依达拉奉防护过氧化氢（H2O2）损伤神经细胞PC12的分子机制,为依达拉奉在脑出血疾病的治疗利用提供理论依据。方法:本研究设置对照组（PC12细胞）、损伤组[PC12细胞+H2O2（600 μmol/L）]和处理组[PC12细胞+H2O2（600 μmol/L）+依达拉奉（0.5 mmol/L）]。观察依达拉奉对PC12细胞氧化损伤防护效果。结果:损伤组PC12细胞繁殖下降,而处理组细胞数量接近对照组。细胞流式实验显示:处理组PC12细胞没有发生明显的凋亡,而损伤组细胞凋亡率稍高。与对照组比较,损伤组细胞内ROS的荧光强度显著升高,损伤组细胞培养上清液中SOD、GSH-Px活性均显著降低,而MDA含量显著升高（P<0.05）。与损伤组比较,处理组细胞内ROS的荧光强度显著降低,处理组细胞培养上清液中SOD、GSH-Px的活性均显著提高,MDA水平显著降低（P<0.05）。Western blot实验分析结果显示:处理组中ATG7表达显著增强,同时,LC3Ⅰ含量减少,而LC3Ⅱ含量增加。结合KEGG富集分析发现:在损伤组和对照组间,有4条信号通路发生了显著性变化,其中mTOR信号通路和Caspase介导的信号通路被激活;在处理组和对照组间,有12条信号通路发生了显著性变化,其中mTOR信号通路和MAPK信号通路被激活,而与细胞凋亡密切相关的Caspase信号通路没有显著增强。结论:依达拉奉通过增强PC12细胞自噬而防护氧损伤。该研究为依达拉奉在氧损伤对神经元细胞保护机制的研究提供了一定的理论参考。

关键词