摘要

目的：利用小干扰RNA(siRNA)靶向RALA基因，使其表达受抑制后探讨对前列腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其可能的机制。方法：采用RT-PCR检测前列腺癌DU145、PC-3和LNCap细胞中RALA mRNA的表达水平。通过LipofectamineTM 2000将RALA-siRNA转染体位培养的DU145细胞株，采用MTT法检测RALA-siRNA对DU145细胞株增殖的影响；Transwell实验检测RALA-siRNA对DU145细胞株迁移能力的影响；流式细胞术检测RALA-siRNA对DU145细胞株凋亡影响。应用RTPCR及Western blot方法检测沉默RALA基因后DU145细胞株中RALA的表达水平。结果：RT-PCR检测结果提示DU145细胞株中RALA mRNA的表达水平高于PC-3、LNCap细胞株，其相对表达水平分别为（0.83±0.02）、（0.37±0.07）和（0.41±0.01），差异均有统计学意义（P<0.05）。MTT检测结果显示，转染RALA-siRNA后DU145细胞株的增殖明显受抑制，与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;Transwell实验结果显示，与空白对照组及阴性对照组相比较，RALA-siRNA组穿膜细胞数低于两者（P<0.05）。流式细胞术检测结果显示，RALA-si RNA组细胞凋亡率明显高于空白对照组及阴性对照组（P<0.05）。Western blot检测结果显示比较阴性对照组、空白对照组，RALA-si RNA组的RALA蛋白的表达明显受抑制（P<0.05）。结论：RALA基因在前列腺癌DU145细胞株中的表达水平较高，沉默RALA基因可使DU145细胞增殖、迁移能力受限，提示在前列腺癌治疗上，RALA可作为一个潜在的靶点。

关键词