摘要

目的:探讨Rna干扰介导FAS基因沉默对小鼠结肠癌细胞免疫逃逸的抑制作用。方法:设计针对Balb/c小鼠Fas编码基因的dsRNA分子,构建分子表达载体,采用脂质体法转染Balb/c小鼠脾淋巴细胞。设置实验组(转染目标质粒),阴性对照组(转染空载体质粒)及空白对照组(未转染),建立稳定表达克隆。采用流式细胞仪检测各组淋巴细胞FAS/FASL表达水平。通过同种异体混合淋巴细胞肿瘤细胞培养实验(AMLTC),采用MTT(二苯基四氮唑溴盐)法观察CT26细胞对稳定表达克隆淋巴细胞的诱导凋亡作用。结果:转染分子载体后实验组淋巴细胞膜FAS抗原表达水平明显下降,与阴性对照组及空白对照组对比存在统计学差异。同种异体混合淋巴细胞培养实验(AMLTC)证实与CT26共培养的实验组淋巴细胞凋亡减少,与对照组比较存在显著性差异。结论:RNA干扰介导的FAS基因沉默可有效封闭淋巴细胞表面FAS抗原表达,减少肿瘤细胞通过FAS/FASL途径诱导抗肿瘤淋巴细胞凋亡的发生,从而增强宿主抗肿瘤免疫效应,抑制肿瘤细胞增殖转移。

关键词