摘要

目目的的：从兔滑膜组织的炎症调控及LXRs/NF-κB通路关键节点蛋白的表达情况探讨壮骨健膝方对兔膝骨关节炎（KOA）滑膜组织炎症的干预效应及机制。方法：制备兔空白血清及含药血清以备滑膜组织干预使用。将22只兔按照随机数字表法分为造模组16只和空白组6只，造模组予右后肢膝关节腔注射木瓜蛋白酶制备KOA模型，模型鉴定成功后，无菌操作下切取兔右后肢膝关节内滑膜组织，将其剪碎成大小约1～2 mm3小块，收集60小块，随机分为4组，即模型组、壮骨健膝方组、LXRα抑制剂组和N-CoR抑制剂组，每组15个组织块，每孔3块，每组5孔，置于6孔板中培养，分别给予10%空白血清、10%含药血清、10%含药血清+5CPPSS-50、10%含药血清+ML-792干预；空白组滑膜同法制备，给予10%空白血清培养，5孔。7 d后收集滑膜组织，各组取2孔滑膜组织块行HE染色，剩余滑膜组织行Western blot和ELISA检测相关指标。结果果：(1)在形态学方面，与空白组比较，模型组HE染色可见滑膜内衬层细胞增生且排列紊乱明显、大量炎性细胞浸润及纤维组织增生等改变，形态学评分显著升高（P<0.05）；与模型组比较，壮骨健膝方组可见滑膜内衬层细胞轻度增生排列紊乱、稀疏散在炎性细胞浸润及少量纤维组织增生等改变，形态学评分显著降低（P<0.05）；分别与LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组比较，壮骨健膝方组病理改变形态学评分显著降低（P<0.05）。(2)在炎症相关指标方面，干预后与空白组比较，模型组IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量显著升高（P<0.05）；与模型组比较，LXRα抑制剂组、N-CoR抑制剂组、壮骨健膝方组上述指标含量均显著降低（P<0.05）；分别与LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组比较，壮骨健膝方组上述指标含量均显著降低（P<0.05）；壮骨健膝方组干预前后比较，IL-1β、TNF-α含量显著降低（P<0.05）。(3)在通路相关蛋白表达方面，与空白组比较，模型组LXRα、N-CoR蛋白表达显著下降（P<0.05）,P50、P65蛋白表达显著上升（P<0.05）；与模型组比较，LXRα抑制剂组LXRα及N-CoR蛋白、N-CoR抑制剂组N-CoR蛋白无显著降低（P>0.05）,P50、P65蛋白表达显著下降（P<0.05），壮骨健膝方组LXRα、N-CoR蛋白表达显著升高（P<0.05）,P50、P65蛋白显著降低（P<0.05）；分别与LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组比较，壮骨健膝方组LXRα、N-CoR蛋白表达显著升高（P<0.05）,P50、P65蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论：壮骨健膝方可改善滑膜内衬层细胞增生及排列紊乱、炎性细胞浸润及纤维组织增生等病理表现，减少组织中炎症相关指标的含量，从而减轻兔KOA滑膜组织炎症反应，这可能与其上调滑膜组织中滑膜细胞LXRs/NF-κB通路上LXRα、N-CoR蛋白表达，从而下调P50、P65蛋白，降低通路的活性，进而减少IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13等下游产物有关。

关键词