摘要

目的探讨免关节软骨细胞分离、培养和鉴定的方法,建立软骨细胞的体外培养体系。方法4周龄新西兰白兔采用机械-酶消化法.分离膝关节软骨细胞接种培齐以及传代培养,倒置相差显微镜观察细胞形态.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。结果成功建立了体外培养软骨细胞的实验方法。原代培养的软骨细胞呈多角形.传代3次后出现反分化。形态学、免疫化学染色显示细胞培养3代以内可以保持表型的稳定。甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性。细胞传至5代后,出现"成纤维细胞样"。结论本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第2代、第3代细胞生长良好.适合于实验研究:软骨细胞5代培养后,细胞表型发生改变。

关键词