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福建中医药大学主办
[1] 福建中医药大学附属人民医院
[2] 福建中医药大学附属第三人民医院
[3] 福建中医药大学中西医结合研究院
[4] 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室
目的 研究白花蛇舌草(HDW)通过lncRNA MALAT1/Slug/Smad通路调控上皮间质转化(EMT)对结肠癌细胞迁移和侵袭的抑制作用。方法 取对数生长期人结肠癌HCT-116细胞,分为空白组、药物组、病毒组和药物联合病毒组。空白组和药物组加入不含lncRNA MALAT1的空载慢病毒液,病毒组和药物联合病毒组加入含lncRNA MALAT1过表达慢病毒液,获得稳定转染的细胞系。空白组和病毒组用0 mg/mL HDW药液干预,药物组和药物联合病毒组用0.5 mg/mL HDW药液干预,均干预24 h。RT-qPCR法检测细胞lncRNA MALAT1mRNA相对表达水平;MTT法检测细胞活力;划痕实验检测细胞划痕愈合能力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞锌指转录因子Slug、锌指转录因子Snail、转化生长因子-β(TGF-β)、Smad2/3、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达量以及p-Smad/Smad。结果 与空白组比较,药物组lncRNA MALAT1 mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05),细胞活力明显降低(P<0.05),细胞划痕愈合能力与迁移、侵袭能力明显降低,Slug、Snail、TGF-β、N-cadherin、Vimentin蛋白表达量和p-Smad/Smad明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量明显提高(P<0.05);病毒组lncRNA MALAT1 mRNA相对表达水平明显升高(P<0.05),细胞活力明显升高(P<0.05),细胞划痕愈合能力与迁移、侵袭能力明显提高,Slug、Snail、TGF-β、N-cadherin、Vimentin蛋白表达量和p-Smad/Smad明显提高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量明显降低(P<0.05)。与病毒组比较,药物联合病毒组lncRNA MALAT1 mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05),细胞活力明显降低(P<0.05),细胞划痕愈合能力与迁移、侵袭能力明显降低,Slug、Snail、TGF-β、N-cadherin、Vimentin蛋白表达量和p-Smad/Smad明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量明显提高(P<0.05)。结论 HDW可通过抑制lncRNA MALAT1/Slug/Smad信号通路,减少EMT,进而抑制大肠癌细胞的迁移和侵袭。
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