摘要

目的 基于TLR4/NF-κB信号通路探讨葛根黄连黄芩汤改善葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导溃疡性结肠炎小鼠炎症反应的作用机制。方法 20只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空白组、中药组、模型组、模型+中药组。模型组和模型+中药组采用2.5%DSS溶液连续饮用7 d，再换纯水饮用4 d构建急性溃疡性结肠炎小鼠模型。中药组及模型+中药组小鼠按体质量2 g/（kg·d）给予葛根黄连黄芩汤连续灌胃11 d，空白组及模型组小鼠给予等体积的生理盐水灌胃。每天记录小鼠体质量变化，同时采用疾病活动指数（DAI）评分法观察4组小鼠体质量、粪便黏稠度、粪便潜血的变化；观察4组小鼠结肠组织整体性状，测量结肠长度；HE染色法观察4组小鼠结肠组织病理变化；Western blot检测4组小鼠结肠组织中TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量；免疫组化（IHC）法检测4组小鼠结肠组织中p-P65蛋白定位及阳性表达；qPCR法检测4组小鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平；采用眼球取血法将血液离心收集血清，酶联免疫（ELISA）法检测4组小鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果 与空白组比较，模型组小鼠体质量下降，DAI评分显著升高（P<0.05）；结肠长度缩短（P<0.05）；结肠黏膜糜烂充血严重，炎症细胞浸润明显，TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量显著升高（P<0.05）；结肠中p-P65的阳性表达率显著增加，且入核数量增加（P<0.05）；结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平显著升高（P<0.05）；血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高（P<0.05）。与模型组比较，模型+中药组小鼠体质量下降幅度有所缓解，DAI评分低于模型组（P<0.05），结肠长度延长（P<0.05）；结肠黏膜轻度糜烂，炎症细胞浸润减少；TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量显著降低（P<0.05）；结肠中p-P65的阳性表达率显著降低（P<0.05），且入核数量减少；IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平显著降低（P<0.05）；血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低（P<0.05）。结论 葛根黄连黄芩汤可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活，减轻炎症反应，从而起到治疗溃疡性结肠炎的作用。

关键词