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福建中医药大学主办
[1] 福建中医药大学附属康复医院
[2] 福建省康复技术重点实验室
[3] 古田县中医院
[4] 福建中医药大学康复医学院
[5] 福建中医药大学附属人民医院
目的 探讨经筋理论指导下针刀髌周松解法对膝骨性关节炎(KOA)兔线粒体凋亡通路的影响。方法 采用随机数字表法将18只6月龄健康雄性新西兰兔分为空白组、模型组和针刀组,每组6只。参考改良的Videman法,将模型组和针刀组兔的左后肢制动6周以制备兔KOA模型,以Lequesne MG行为学评分总分≥4分认为造模成功。针刀组选取股内侧肌、股外侧肌、髌内侧支持带、髌外侧支持带、髌韧带在髌骨上的附着点及鹅足腱胫骨内髁附着点行针刀松解,每周1次,共4次。其余2组正常饲养,只进行同样抓取及固定,不予治疗。干预结束后1周,取3组兔的膝关节软骨组织样本,采用甲苯胺蓝染色观察软骨组织形态学变化,Western blot和RT-qPCR检测软骨细胞内线粒体凋亡通路中凋亡关键指标[肿瘤蛋白P53(P53)、抗凋亡关键指标B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、Bcl-2]的蛋白相对表达量和mRNA转录水平变化。结果 与空白组比较,模型组软骨面粗糙,软骨细胞排列疏松紊乱、数量减少、存在明显空泡细胞、蓝染明显减少,潮线模糊,P53、Bax、Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白相对表达量和mRNA转录水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量和mRNA转录水平下降(P<0.05);与模型组比较,针刀组软骨面平滑程度有所改善,软骨细胞排列较为均匀、数量有所增加、蓝染稍减少,潮线模糊程度有所改善,P53、Bax、Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白相对表达量和mRNA转录水平下降(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量和mRNA转录水平升高(P<0.05)。结论 针刀髌周松解法能够影响线粒体凋亡通路,有效减少KOA兔凋亡基因P53、Bax、Cyt C、Caspase-3、Caspase-9的表达,增加抗凋亡基因Bcl-2的表达,从而延缓软骨退变。
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