摘要

目的 基于网络药理学和动物实验探讨蒌芍汤治疗脑缺血再灌注损伤（CIRI）的机制。方法 检索TCMSP数据库筛选蒌芍汤的活性成分，利用PubChem、SwissTargetPrediction数据库预测作用靶点。检索Genecards、OMIM、Drug Bank数据库收集CIRI疾病相关靶点。绘制韦恩图，提取蒌芍汤治疗CIRI的潜在靶点，采用Cytoscape 3.10.0软件构建“药物活性成分-潜在靶点”网络。利用STRING数据库及Cytoscape 3.10.0软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，筛选核心靶点，再使用DAVID平台进行潜在靶点功能富集分析。选取50只6周龄雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和蒌芍汤低、中、高剂量组，每组10只。采用大脑中动脉闭塞法构建大鼠CIRI模型。蒌芍汤低、中、高剂量组分别给予0.9、1.7、3.4 g/（kg·d）蒌芍汤灌胃，假手术组与模型组灌胃饮用水，1次/d，连续给药7 d。通过评估大鼠肌力、神经缺损mNSS评分和脑梗死面积，筛选蒌芍汤最佳干预剂量。另取6周龄雄性SD大鼠40只，随机分为假手术组、模型组、蒌芍汤组和银杏叶组，每组10只。采用大脑中动脉闭塞法构建大鼠CIRI模型。蒌芍汤组给予1.7 g/（kg·d）蒌芍汤灌胃，银杏叶组给予0.012 g/（kg·d）银杏叶片灌胃，假手术组与模型组灌胃饮用水，1次/d，连续给药7 d。采用苏木素-伊红（HE）染色、Nissl染色、Tunel染色观察大鼠缺血侧大脑皮层组织病理变化；Western blot检测关键通路相关蛋白表达水平。结果 筛选出蒌芍汤治疗CIRI潜在靶点152个，蒌芍汤治疗CIRI的主要活性成分为芍药苷、甘草苷、阿魏酸等，核心靶点为IL6、AKT1、IL1B、TNF、TP53等，信号通路涉及AGE-RAGE、IL-17、MAPK等。干预7 d后，中剂量组足抓力均高于低剂量组和高剂量组（P<0.05）,mNSS评分、脑梗死面积均低于低剂量组和高剂量组（P<0.05），为最佳干预剂量。与假手术组比较，模型组缺血侧大脑皮层病理变化明显，Nissl阳性神经细胞减少，Tunel阳性细胞占比增多（P<0.05）,ERK1、ERK5、JNK和p38蛋白表达水平均上调（P<0.05）。与模型组比较，蒌芍汤组和银杏叶组缺血侧大脑皮层病理变化均减轻，Nissl阳性神经细胞均增多，Tunel阳性细胞占比均减少（P<0.05）,ERK1、ERK5、JNK和p38蛋白表达水平均下调（P<0.05）。结论 蒌芍汤可改善CIRI模型大鼠神经功能和缺血侧大脑皮层病理改变，其机制可能涉及多成分、多靶点、多通路，MAPK信号通路可能是其关键作用途径。

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