摘要

目的 观察透骨消痛胶囊（TGXTC）含药血清介导长链非编码RNA(lncRNA)XIST/电压门控钠离子通道1.7亚型（Nav1.7）对软骨细胞退变的影响。方法 取3周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠20只，从小鼠膝关节分离关节软骨，提取软骨细胞并培养。将第2代软骨细胞悬液接种至6孔板后，随机分为sh-NC组、sh-XIST组、sh-NC+IL-1β组和sh-XIST+IL-1β组，分别给予含空载慢病毒、sh-XIST慢病毒、空载慢病毒+IL-1β、shXIST慢病毒+IL-1β的培养基干预24 h后，采用qPCR检测软骨细胞lncRNA XIST和Nav1.7 mRNA表达水平。将第2代软骨细胞悬液接种至6孔板后，随机分为sh-NC组、sh-NC+IL-1β组、sh-XIST+IL-1β组、sh-NC+IL-1β+TGXTC组和sh-XIST+IL-1β+TGXTC组，分别给予含空载慢病毒、空载慢病毒+IL-1β、sh-XIST慢病毒+IL-1β、空载慢病毒+IL-1β、sh-XIST慢病毒+IL-1β的培养基干预24 h后，sh-NC组、sh-NC+IL-1β组和sh-XIST+IL-1β组更换完全培养基继续培养24 h,sh-NC+IL-1β+TGXTC组和sh-XIST+IL-1β+TGXTC组更换15%TGXTC含药血清继续培养24 h，采用Western blot检测软骨细胞中Nav1.7、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、环氧化酶2(COX2)、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)、半胱天冬蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果 与sh-NC组比较，sh-XIST组lncRNA XIST和Nav1.7 mRNA表达水平显著降低（P<0.05）；与sh-NC+IL-1β组比较，sh-XIST+IL-1β组lncRNA XIST和Nav1.7 mRNA表达水平显著降低（P<0.05）。与sh-NC组比较，sh-NC+IL-1β组Nav1.7、MMP-3、COX2、ADAMTS-5和Caspase-3蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）；与sh-NC+IL-1β组比较，sh-XIST+IL-1β组和sh-NC+IL-1β+TGXTC组Nav1.7、MMP-3、COX2、ADAMTS-5、Caspase-3蛋白表达水平均降低（P<0.05）；与sh-NC+IL-1β+TGXTC组比较，sh-XIST+IL-1β+TGXTC组Nav1.7、MMP-3、COX2、ADAMTS-5、Caspase-3蛋白表达水平均升高（P<0.05）。结论 lncRNA XIST敲减可以抑制软骨细胞Nav1.7表达，TGXTC含药血清可能通过介导lncRNA XIST/Nav1.7表达，抑制软骨细胞退变。

关键词