摘要

目的 基于NMDAR1-PSD-nNOS通路探讨栝楼桂枝颗粒（GLGZG）对神经元兴奋性毒性损伤后突触可塑性的影响，为GLGZG治疗缺血性脑卒中提供实验依据。方法 取新生大鼠的原代海马神经元，分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组，建立N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）诱导神经元兴奋性毒性损伤模型，对照组加入不含有NMDA的完全培养基进行培养，模型组用含有200μmol/L NMDA的完全培养基诱导损伤6 h，低、中剂量组分别予以含有100、200μg/mL GLGZG溶液的完全培养基干预24 h后，再更换为含有200μmol/L NMDA的完全培养基诱导损伤6 h。干预后采用电子显微镜观察4组神经元形态，MTT法检测4组神经元存活率，乳酸脱氢酶（LDH）法检测4组神经元LDH水平，qPCR检测4组神经元NeuN、GAP-43、PSD-95、NMDAR1mRNA转录水平，Western blot检测4组神经元NeuN、GAP-43、PSD-95、MAP-2、Synapsin-1、NMDAR1、nNOS蛋白相对表达量。结果 与对照组比较，模型组神经元形态异常，神经元存活率降低，LDH水平升高，NeuN、GAP-43、PSD-95、NMDAR1 mRNA转录水平均显著降低（P<0.05）,NeuN、GAP-43、PSD-95、MAP-2、Synapsin-1、NMDAR1、nNOS蛋白相对表达量均降低（P<0.05）。与模型组比较，低、中剂量组神经元形态明显改善且神经元存活率显著提高，LDH水平降低（P<0.05）；低剂量组NeuN、NMDAR1 mRNA转录水平以及NeuN、GAP-43、PSD-95、Synapsin-1蛋白相对表达量均上升（P<0.05），中剂量组NeuN、GAP-43、PSD-95、NMDAR1 mRNA转录水平以及NeuN、GAP-43、PSD-95、Synapsin-1、MAP-2、NMDAR1、nNOS蛋白相对表达量均提高（P<0.05）。与低剂量组比较，中剂量组LDH水平以及MAP-2、Synapsin-1蛋白相对表达量均升高（P<0.05）。结论GLGZG能够减轻NMDA诱导的神经元兴奋性毒性损伤，可能与GLGZG可通过调控NMDAR1-PSD-nNOS通路、改善神经元突触可塑性有关。

关键词