摘要

目的 探讨凉血解毒化瘀方对慢性肝损伤小鼠向急性肝衰竭转化的预防效果及其对Toll样受体4(TLR4)的调控作用。方法 取6周龄SPF级雄性BALB/c小鼠60只，采用随机数字表法分为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组12只。除正常组外，其余4组按体质量5 mL/kg腹腔注射20%四氯化碳（CCl4）以构建慢性肝损伤小鼠模型，正常组腹腔注射等剂量生理盐水，2次/周，连续8周。经组织病理学与血清生化分析证实慢性肝损伤造模成功后，低、中、高剂量组按体质量10 mL/（kg·d）分别灌胃0.75、1.50、3.00 g/mL凉血解毒化瘀方药液，正常组、模型组灌胃等剂量生理盐水，连续灌胃28 d后，模型组与各剂量组分别按体质量5 mL/kg一次性腹腔注射2μg/mL脂多糖（LPS）和0.2 g/mL D-氨基半乳糖（D-GalN）以诱导慢性肝损伤小鼠向急性肝衰竭转化，正常组腹腔注射等剂量生理盐水。3 d后采用生化分析法检测5组小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）含量，HE染色观察5组小鼠肝组织病理形态变化，qPCR检测5组小鼠肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、Toll样受体4(TLR4)mRNA转录水平，采用免疫荧光染色检测5组小鼠肝组织TLR4蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组血清ALT、AST、TBIL含量显著提高（P<0.05）,HE染色结果显示肝组织出现肝细胞坏死，伴随大量纤维化改变及炎症细胞浸润，肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4 mRNA转录水平升高（P<0.05），肝组织TLR4蛋白表达水平增高。与模型组比较，各剂量组血清ALT、AST、TBIL含量降低（P<0.05）,HE染色结果显示肝细胞坏死、纤维化，炎症细胞浸润程度减少，肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4 mRNA转录水平降低（P<0.05），肝组织TLR4蛋白表达量减少。与低剂量组比较，中、高剂量组血清ALT、AST水平降低更明显（P<0.05）,HE染色结果显示肝细胞坏死、纤维化，炎症细胞浸润程度更轻，肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4 mRNA转录水平降低更明显（P<0.05），肝组织TLR4蛋白表达水平减少更明显。结论 凉血解毒化瘀方可用于预防慢性肝损伤小鼠向急性肝衰竭转化，并具有抗炎作用，其机制可能通过抑制TLR4高表达而实现的。

关键词