摘要

目的 利用网络药理学技术结合动物实验验证，探讨玉女煎治疗糖尿病肾病可能的作用靶点与作用机制。方法 从基因表达综合数据库（GEO）中获得人糖尿病肾病的差异基因；通过TCMSP、HERB和TCMID数据库搜集玉女煎活性成分及其对应的作用靶点。将获得的差异基因与玉女煎的作用靶点进行交集分析获得共同靶点，并对共同靶点进行蛋白互作（PPI），获取玉女煎作用的核心靶点。构建“玉女煎活性成分-共同靶点”网络，获取玉女煎的关键活性成分。通过KEGG富集分析，获取玉女煎作用的核心基因。将玉女煎中关键的活性成分和核心靶点及核心基因进行分子对接。以自发性2型糖尿病大鼠（GK大鼠）肾脏为研究对象，蛋白印迹检测网络药理学及分子对接预测的信号通路相关蛋白的表达情况。结果 通过GEO基因芯片差异分析，获得了1 434个糖尿病肾病的差异基因。从数据库中筛选了37个玉女煎活性成分，共对应419个靶点。通过交集分析共获得47个共同靶点。PPI互作网络拓扑分析可得核心靶点血管细胞黏附分子1(VCAM1)，通过网络分析玉女煎关键活性成分20个。KEGG结果可知玉女煎作用的核心基因为上皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（VEGFA）和磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸肌醇-3-激酶（PI3KCA），为PI3K/Akt/mTOR信号通路上的靶点。分子对接显示玉女煎的关键活性成分薯蓣皂苷元-VEGFA、山柰酚-VCAM1有比较强的结合活性。动物实验结果显示，玉女煎可以上调GK大鼠肾脏组织中PI3KCA和VEGFA蛋白表达（P<0.05,P<0.01），下调EGF蛋白以及自噬相关基因ATG5和Beclin 1蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 玉女煎治疗糖尿病肾病的作用机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

关键词