摘要

目的 观察股骨头坏死愈胶囊（FHNHC）对激素性股骨头坏死（SANFH）大鼠破骨细胞生成的影响。方法 (1)体外实验：体外分离和培养大鼠骨髓巨噬细胞（BMDMs），活死细胞荧光染色检测FHNHC提取物对BMDMs活性的影响。将BMDMs分为对照组、FHNHC低剂量组和FHNHC高剂量组，3组均使用含30 ng/mL M-CSF和50 ng/mL RANKL的α-MEM完全培养基向破骨细胞诱导，与此同时FHNHC低剂量组和FHNHC高剂量组分别加入200、400μg/mL FHNHC提取物溶液进行干预。每3 d更换培养基，诱导7 d。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察破骨细胞生成情况；免疫荧光染色检测破骨细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达；Western blot检测组织蛋白酶K(CTSK)、MMP-9、核因子性活化T细胞转录因子1(NFATc1)蛋白表达量。(2)体内实验：将32只8周龄SD大鼠随机分为对照组（n=8）和造模组（n=24），造模组采用注射脂多糖联合甲泼尼松龙琥珀酸钠建立SANFH大鼠模型。采用随机数字表法将造模成功的大鼠分为模型组、低剂量组和高剂量组。低、高剂量组分别按生药量0.4、0.6 g/（kg·d）给予FHNHC提取物药液灌胃，对照组和模型组按4 mL/（kg·d）给予生理盐水灌胃，连续灌胃8周。Micro-CT观察大鼠股骨头结构并分析骨密度（BMD）、骨体积与总积比（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）和骨小梁分离度（Tb.Sp）;HE染色观察大鼠股骨头病理形态学。结果 (1)体外实验：与对照组比较，FHNHC低、高剂量组破骨细胞生成减少，体积变小；MMP-9荧光强度明显减弱（P<0.05）,CTSK、NFATc1、MMP-9蛋白表达量均明显降低（P<0.05）。与FHNHC低剂量组比较，FHNHC高剂量组MMP-9蛋白荧光强度明显减弱（P<0.05）,CTSK、NFATc1、MMP-9蛋白表达量均明显降低（P<0.05）。(2)体内实验：模型组大鼠股骨头骨小梁体断裂稀疏、结构紊乱，出现细胞核固缩，空骨陷窝增加，在骨髓腔内可见大量脂肪颗粒；低、高剂量组大鼠股骨头骨小梁的断裂稀疏情况改善，空骨陷窝以及脂肪颗粒的数量减少，其中高剂量改善更明显。与对照组比较，模型组BMD、BV/TV、Tb.Th均明显降低（P<0.05）,Tb.Sp明显升高（P<0.05）；与模型组比较，低、高剂量组BMD、BV/TV、Tb.Th均明显升高（P<0.05）,Tb.Sp明显降低（P<0.05）；与低剂量组比较，高剂量组BMD、BV/TV、Tb.Th均明显升高（P<0.05）,Tb.Sp明显降低（P<0.05）。结论 FHNHC能够抑制破骨细胞的生成以及骨吸收功能，改善SANFH大鼠的股骨头结构。

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