摘要

目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对低氧状态下肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的影响。方法本实验时间为2022年3月—2023年9月。将PASMC分为对照组、低氧组、HMGB1中和抗体(HMGB1 Ab)组、HMGB1Ab+单钠尿酸盐(MSU)组，对照组：PASMC置于37℃、21%O2、5%CO2培养箱中常氧培养24 h；低氧组：PASMC置于37℃、3%O2、5%CO2培养箱中低氧培养24 h;HMGB1 Ab组：PASMC置于37℃、3%O2、5%CO2培养箱中低氧培养24 h，加入终浓度为20μg/ml的HMGB1 Ab培养3 h;HMGB1 Ab+MSU组：PASMC置于37℃、3%O2、5%CO2培养箱中低氧培养24 h，加入终浓度为20μg/ml的HMGB1 Ab培养3 h，然后加入终浓度为200 g/L的MSU培养3 h。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力，细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力，免疫荧光染色观察各组PASMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况，实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组PASMC中HMGB1及细胞焦亡相关因子[NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、gasdermin D(GSDMD)、白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)]的mRNA相对表达量，Western blot法检测各组PASMC中HMGB1及细胞焦亡相关因子相对表达量。结果 低氧组细胞增殖活力高于对照组，HMGB1 Ab组细胞增殖活力低于低氧组，HMGB1 Ab+MSU组细胞增殖活力高于HMGB1 Ab组(P<0.05)。低氧组划痕愈合率高于对照组，HMGB1 Ab组划痕愈合率低于低氧组，HMGB1 Ab+MSU组划痕愈合率高于HMGB1 Ab组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示，与对照组比较，低氧组细胞荧光染色强度明显增强，α-SMA表达增加；与低氧组比较，HMGB1 Ab组细胞荧光染色强度明显减弱，α-SMA表达减少；与HMGB1 Ab组比较，HMGB1 Ab+MSU组细胞荧光染色强度明显增强，α-SMA表达增加。低氧组PASMC中HMGB1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA及蛋白相对表达量高于对照组，HMGB1 Ab组PASMC中HMGB1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA及蛋白相对表达量低于低氧组，HMGB1 Ab+MSU组PASMC中HMGB1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA及其相对表达量高于HMGB1 Ab组(P<0.05)。结论 HMGB1与低氧状态下PASMC增殖、迁移相关，靶向HMGB1 Ab能够抑制低氧诱导的PASMC异常增殖、迁移，该作用与其抑制细胞焦亡有关。

关键词