摘要

目的 探讨circ＿LAS1L通过调控分泌型卷曲相关蛋白5（SFRP5）影响心肌细胞存活的机制。方法 本实验时间为2023年1—5月。（1）将心肌细胞H9c2随机分为对照组（不进行转染）、NC组（转染空载体）、circ＿LAS1L组（转染circ＿LAS1L过表达载体），然后检测各组circ＿LAS1L表达水平及m6A修饰酶〔甲基转移酶3（METTL3）、甲基转移酶14（METTL14）、Wilms肿瘤1相关蛋白（WTAP）、脂肪和肥胖相关蛋白（FTO）、α-酮戊二酸依赖性双加氧酶alkB同系物5（ALKBH5）〕、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平。（2）将心肌细胞H9c2随机分为对照组、si-NC组（转染siRNA）、si-circ＿LAS1L组（转染circ＿LAS1L siRNA），各组检测指标同上。（3）将心肌细胞H9c2随机分为对照组、NC组、si-circ＿LAS1L组、si-METTL3组（转染METTL3 siRNA）、si-circ＿LAS1L+METTL3组（共转染circ＿LAS1L siRNA和METTL3过表达载体），检测各组circ＿LAS1L表达水平和METTL3、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平及N6-甲基腺苷（m6A）+ SFRP5 mRNA表达水平、心肌细胞存活指标〔细胞存活力、乳酸脱氢酶（LDH）释放率、细胞凋亡率〕。结果 circ＿LAS1L组circ＿LASIL表达水平及METTL3、METTL14、WTAP、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平高于对照组，FTO、ALKBH5 mRNA、蛋白表达水平低于对照组（P<0.05）。si-circ＿LAS1L组circ＿LASIL表达水平及METTL3、METTL14、WTAP、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平低于对照组，FTO、ALKBH5 mRNA、蛋白表达水平高于对照组（P<0.05）。si-circ＿LAS1L组、si-circ＿LAS1L+METTL3组circ＿LAS1L表达水平低于对照组，si-circ＿LAS1L组、si-METTL3组METTL3、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平及m6A+ SFRP5 mRNA表达水平低于对照组、si-circ＿LAS1L+METTL3组（P<0.05）。si-circ＿LAS1L组、si-METTL3组细胞存活力低于对照组、si-circ＿LAS1L+METTL3组，LDH释放率、细胞凋亡率高于对照组、si-circ＿LAS1L+METTL3组（P<0.05）。结论 circ＿LAS1L通过METTL3提高SFRP5的m6A修饰水平，从而促进SFRP5表达，进而维持心肌细胞存活，且circ＿LAS1L/METTL3/SFRP5轴是与心肌细胞功能密切相关的重要信号通路。

关键词